介绍重组肠激酶的使用注意事项

　　重组肠激酶（Enterokinase,lightchain）是一种高度专一性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。由于肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点，它被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。

　　肠激酶具有高度专一性，水解效率高的特点，它被广泛地应用于基因工程产品的开发，其应用之一是作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白质的特异性断裂，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、生物化学、分子生物学等研究。本重组表达产品携带his标签，便于切割目标蛋白后除去，保证酶切的可控性和特异性。

　　重组肠激酶的注意事项

　　在＞200mM咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：

　　1、为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中，再进行酶切。

　　2、若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切500µg蛋白）。

　　3、如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。