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异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质,常用于蓝白斑筛选及诱导的细菌内的蛋白表达等。当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和本产品,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体
X-gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点,当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时,或M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入本产品和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。
氯霉素(Chloramphenicol)是一种广谱抗生素,通过与50S核糖体亚基结合,抑制氨酰-tRNA连接到核糖体,阻断肽酰转移酶步骤,从而抑制蛋白质合成,还能抑制叶绿体和线粒体蛋白质合成,和核糖体产生(p)ppGpp,抑制RNA转录,通常用作一种抑菌剂。有效作用于各种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,特别是引起脑膜炎的细菌,常用来研究蛋白质合成和筛选氯霉素抗性基因的转化。
链霉素(Streptomycin)是一种氨基糖苷类抗生素,通过与30S核糖体结合致使mRNA误读,从而抑制蛋白质的合成。对革兰氏阳性菌和阴性菌均有效。链霉素可在细胞培养中抑制细菌污染;分子生物学中,常用来筛选成功转化链霉素基因的细菌克隆。
羧苄青霉素(Carbenicillin)是一种结构类似青霉素的β-内酰胺类抗生素。不同于大多数β-内酰胺,此抗生素主要作用于包括铜绿假单胞菌和常见肠道菌在内的革兰氏阴性菌。其作用机制在于失活细菌细胞膜内部的转肽酶,进而抑制细菌细胞壁的合成,终导致细菌死亡。因其稳定性提高,常替代青霉素用于筛选步骤,能有效减少卫星菌落生成。另外,常用在植物培养中,以调解细菌生长,使其再生频率显
四环素(Tetracycline)是一种光谱型抗生素,靶向抑制各种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,以及某些真核细胞的生长。其作用机制在于:主动扩散穿透细胞膜上的质子通道,进入细胞后与30S核糖体结合,通过阻止氨基酰-tRNA转移到mRNA-核糖体复合物上的受体部位(A部位),从而抑制蛋白质合成。四环素还能与细菌50S核糖体亚基结合,改变细胞膜结构,导致细胞内含物流出。这些抑制效应通过清洗步骤即可逆转,
卡那霉素(Kanamycin)是一种氨基糖苷类抗生素,通过与30S核糖体结合致使mRNA误读,从而抑制蛋白质的合成。对革兰氏阳性菌和阴性菌均有效。卡那霉素可在细胞培养中抑制细菌污染;分子生物学中,常用来筛选成功转化卡那霉素基因的细菌克隆;也常用于农杆菌介导的转化实验,选择性筛选携带npt Ⅱ(APH3)基因的植物组织。
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